В лаборатории молекулярно-генетических и микробиологических методов идет выполнение проекта «Разработка рекомбинантного штамма на основе Pseudomonas putida PCL1760 для биокаталитической трансформации ароматических производных лигнина». (Соглашение № 075-15-2022-254 от 17.06.2022 г.). В результате выполнения проекта планируется получить генно-инженерные конструкции и штамм, созданный с использованием данных конструкций способный к утилизации производных метил-фенолов, которые возникают при разложении лигнина.
На настоящем этапе работ были созданы конструкции содержащие гены катаболизма катехола (Рис. 1). Данные конструкции были использованы для интеграции в геном штамма PCL1760 за счет гомологичной рекомбинации (Рис.2). А результате был получен штамм P. putida PCL6160 с интегрированными в хромосому генами утилизации катехола.
Рисунок 1. Примеры интегративных векторов с клонированными генами катаболизма катехола. Обе платформы сделаны на основе вектора pK18mobSacB.
Рисунок 2 – Двухступенчатая схема проведения эксперимента интеграции Ptac—nah-оперона в состав хромосомальной ДНК штамма P. putida PCL1760.