Клонирование генов катаболизма катехола

Клонирование генов катаболизма катехола

В лаборатории молекулярно-генетических и микробиологических методов идет выполнение проекта «Разработка рекомбинантного штамма на основе Pseudomonas putida PCL1760 для биокаталитической трансформации ароматических производных лигнина». (Соглашение № 075-15-2022-254 от 17.06.2022 г.). В результате выполнения проекта планируется получить генно-инженерные конструкции и штамм, созданный с использованием данных конструкций способный к утилизации производных метил-фенолов, которые возникают при разложении лигнина.

На данном этапе работы ведется клонирование генов деградации ароматических соединений, которые необходимы для утилизации катехола. Изучены опероны и произведен отбор генов пути мета-расщепления катехола плазмиды pWW0, из штаммов R. rhodochrorus и pNAH7 из P. putida KT2440.

 

Рисунок 1 — Экспрессия генов салицилатного пути плазмиды pNAH7 в клетках Ecoli.

В результате экспериментов были клонированы гены из плазмиды pWW0, из штаммов R.rhodochrorus и pNAH7 из P.putida KT2440. Наиболее перспективными для гетерологичной экспрессии оказались гены плазмиды pNAH7, поддерживаемой в штамме P.putida KT2440.